新型農(nóng)殘速測(cè)試劑（二合一）
適用于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法 GB/T 5009.199-2003
產(chǎn)品參數(shù):
詳細(xì)介紹:
【原理及適用范圍】
在一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常情況下，酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物（乙酰膽堿）水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計(jì)在412nm處測(cè)定吸光度隨時(shí)間的變化值，計(jì)算出抑制率。
本產(chǎn)品適用于蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留的快速檢測(cè)。
【試劑配制及保存】
膽堿酯酶：使用時(shí)取100μL，4℃冰箱保存。
底物顯色劑：使用時(shí)取100μL，4℃冰箱保存。
【樣品處理】
整株提取法（適用于韭菜、芹菜等對(duì)酶有一些抑制的蔬菜樣品）
選取韭菜、芹菜有代表性的樣品，擦去表面泥土，稱取試樣3 g（精確至0.1 g，請(qǐng)勿剪碎）置于20~50mL大小的瓶子，加入10 mL蒸餾水，輕輕振搖50 次，靜置5min，用濾紙過(guò)濾，取上清濾液待測(cè)。
整體測(cè)定法
選取油菜、菠菜有代表性的樣品，擦去表面泥土，剪成1 cm左右見(jiàn)方碎片，稱取3 g（精確至0.1 g）放入50mL取樣瓶中，加入10 mL蒸餾水，振搖50次，靜置5 min，用濾紙過(guò)濾，取上清濾液待測(cè)。
【測(cè)試】
對(duì)照測(cè)試：于反應(yīng)管中加入2.5mL蒸餾水，再加入100μL膽堿酯酶，混勻，放置10 min。加入100μL底物顯色劑，搖勻并立即倒入比色杯中，放入測(cè)試通道，按儀器“對(duì)照”鍵測(cè)試3min的吸光度變化值ΔΑ0 。
樣品測(cè)試：于反應(yīng)管中加入2.5mL待測(cè)樣品液，再加入100μL膽堿酯酶，混勻，放置10min后加入100μL底物顯色劑，搖勻并立即倒入比色杯中，放入測(cè)試通道，按儀器“樣品”鍵，測(cè)試3min的吸光度變化值ΔΑt 。
操作提示：在加底物顯色劑的環(huán)節(jié)中，可預(yù)先將底物顯色劑加入比色杯，待靜置時(shí)間一到，馬上將反應(yīng)管中的反應(yīng)液倒入已經(jīng)加有底物顯色劑的比色杯，并迅速放入測(cè)試通道進(jìn)行測(cè)試。這樣可以減少同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣品時(shí)因加底物時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而造成的誤差。
結(jié)果判定：
以分光光度計(jì)測(cè)試時(shí)，按以下表達(dá)式計(jì)算出抑制率：
抑制率(%)=[(ΔΑ0－ΔΑt )/ΔΑ0]×100
以農(nóng)殘檢測(cè)儀檢測(cè)時(shí)其抑制率一般可自動(dòng)計(jì)算。若樣品抑制率≥50%，表示被測(cè)果蔬農(nóng)殘超標(biāo)，為陽(yáng)性結(jié)果。陽(yáng)性結(jié)果的樣品需做2次以上重復(fù)檢測(cè)，多次檢測(cè)仍呈陽(yáng)性需用氣相色譜等儀器做進(jìn)一步確認(rèn)。
【注意事項(xiàng)】
酶活性要求：本試劑盒中酶試劑正常活性ΔΑ>0.3。若要求ΔΑ值控制在0.2~0.3之間，可根據(jù)ΔΑ測(cè)定值自行增減酶量。
保存：試劑盒應(yīng)保存于4~8℃冰箱，保質(zhì)期12個(gè)月。
使用：任何試劑使用時(shí)，用一瓶打開(kāi)一瓶，用完后才使用新的，防止變質(zhì)。
器具專(zhuān)用原則：任何用于移液的器具、容器和槍頭都應(yīng)各自做好標(biāo)記，單獨(dú)使用，以免交叉污染。
試劑只出不入原則：測(cè)試時(shí)，從任何試劑瓶吸出的試劑，禁止再次注射回試劑瓶。
環(huán)境溫度對(duì)測(cè)試的影響：當(dāng)環(huán)境溫度過(guò)低時(shí)（一般低于20℃），測(cè)試時(shí)需作必要保溫措施；產(chǎn)品從冰箱取出后需恢復(fù)到室溫才可使用。
常溫方法：本試劑可用常溫方法測(cè)試，測(cè)試時(shí)試劑室溫放置10min，測(cè)試1min的吸光度變化值ΔΑ0。正常活性ΔΑ0在0.15~0.3之間。
